Die erste grundlegende Schritte im Gen Klonen in Rekombinante DNA-Technologie umfasst die Identifizierung und Isolierung der gewunschten DNA-Sequenz. Beginnt der Prozess im Wesentlichen die gleiche Weise wie Gentechnologen gen Splei?en durchfuhren?. Wissenschaftler identifizieren zuerst die Gens in dem sie Arkane auf einen Vektor, ein Material das Gen in die Bakterien ubertragen mochten. Die Mehrheit der Gene und ihre Funktionen sind in einer kostenlosen DNA oder genomic DNA Bibliothek aufgefuhrt. Sobald das Identifikationsverfahren abgeschlossen ist, muss er oder sie verpflichten sich, Isolierung der Gens selbst aus dem Organismus.
Isolation, den Prozess der Beseitigung des gewunschten Gens vom Rest der Sequenz erfolgt mit Beschrankungs-Enzymen. Beschrankungs-Enzymen sind Proteine, die als Katalysator fur eine chemische Reaktion und Zerspalten der Phosphodiester bond, die kovalente Bindung von die Desoxyribose in DNA. Im Grunde sind diese restriktive Enzyme zur Einschrankung Website, die Lage eingefuhrt, die die Genetiker das Gen entfernen will. Es bricht Teilprogramms und isoliert das gewunschte gen, Einfuhrung in den Vektor bereit.
Einfugen des Gens in den Vektor
Wissenschaftler entfernen einen Teil der Bakterien bekannt als einem Plasmid. Dies ist ein Molekul Lage au?erhalb der chromosomaler DNA, ein idealer Kandidat fur das cloning von Gene zu replizieren. Plasmide sind Double-Stranded und Rundschreiben. Wissenschaftler verwenden Beschrankungs-Enzymen, entfernen die entsprechenden Gene entlang der Plasmid und fugen dann das neue Gen mit einer Fusion Enzym. Um zu verhindern, zusatzliche spaltet auf die Gene, ist eine hydrophobe Alkyl-Molekul eingefuhrt, um die verbleibenden Beschrankungs-Enzymen absto?en. Dieser Prozess hei?t Methylierung. Der Host-Vektor ist nun bereit, den Mikroorganismus eingefuhrt werden.
Einfuhrung des Vektors in die Wirtszelle
Der Plasmid mit dem neuen Gen wird uber zwei verschiedene Modi, wie z. B. das gemeinhin als E. Coli Bakterium Escherichia coli, einer Wirtszelle jetzt vorgestellt. Die erste Methode verwendet platziert die Plasmid mit dem Organismus und fuhrt es in Kalzium-Chlorid. Mit einer Anderung in der Temperatur stimuliert das Molekul des Organismus eingeben. Eine andere Methode besteht darin, den Prozess der Elektroporation, stimuliert die Zelle mit Strom bis die Plasmid eingibt. Dies erstellt eine voll integrierte Zelle mit geanderten Genetik.
Das neue Gen Klonen
Da Plasmide ohne die Verwendung eines Chromosoms replizieren, erstellt es Kopien von sich selbst mit einer sehr schnellen Rate innerhalb der Bakterien. Daruber hinaus wird ein Mikroorganismus z. B. E. Coli schneller als fast alle anderen in der Welt, reproduzieren, eine erstklassige Kandidat fur Recombinant DNA-Forschung. Wissenschaftler einfach das Thema mit den Vektor in einer Kultur und ermoglichen es zu replizieren. Dann brechen mit einem Prozess namens Lysis, sie die Zellen mit den gleichen Beschrankungs-Enzymen als vor. Dies ermoglicht ihnen, das geklonte Gen auf effiziente Weise zu ernten. Mit den folgenden grundlegenden Schritten in gen Klonen in Rekombinante DNA-Technologie, konnen Genetiker mehrere genetische Codes mit neuen Proteinproduktion was zu Zellen mit neuen Funktionen erstellen.
Referenz
"Klonen Rekombinante DNA-Technologie und Gene" Mikrobiologie Verfahren: http://www.microbiologyprocedure.com/biotechnology-in-agriculture/recombinant-dna-technology-and-gene-cloning.html
Rekombinante DNA und Gene Cloning: http://users.rcn.com/jkimball.ma.ultranet/BiologyPages/R/RecombinantDNA.html
Bild-Quelle
Plasmid. (Spaully auf Wikimedia Commons Auskunfte; Creative Commons 2.5; http://Upload.wikimedia.org/Wikipedia/Commons/c/CF/Plasmid_%28english%29.SVG)
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